ПОЛУЧЕНИЕ АНТИТЕЛ К α7-СУБЪЕДИНИЦЕ НИКОТИНОВОГО АЦЕТИЛХОЛИНОВОГО РЕЦЕПТОРА ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ ИММУНОАКТИВНЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПЕПТИДОВ

© 2006 г. О. М. Вольпина, М. А. Титова, Д. О. Короев, Т. Д. Волкова, М. Б. Обозная, М. Н. Жмак, Т. А. Алексеев, В. И. Цетлин

Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 30.06.2005 г. Принята к печати 13.07.2005 г.

Для выбора пептидов, способных стимулировать образование специфических антител к N -концевому экстрацеллюлярному домену α7-субъединицы ацетилхолинового рецептора (АХР) человека, осуществлен теоретический расчет потенциальных В-эпитопов и Т-хелперных эпитопов в этом домене белка. Синтезированы пептиды, отвечающие структуре четырех выбранных участков α7-субъединицы, содержащих от 16 до 23 а. о., а также три их укороченных фрагмента. Проведена иммунизация кроликов как свободными пептидами, так и белковыми конъюгатами их укороченных фрагментов и получена панель антител, направленных на различные экспонированные участки N-концевого домена α7-субъединицы АХР человека. Показано, что все четыре предсказанных пептида способны в свободном виде, без конъюгации с белковым носителем, индуцировать образование противопептидных антител. Свободные пептиды индуцируют образование приблизительно такого же количества антител, как и белковые конъюгаты укороченных фрагментов. Большинство полученных антисывороток содержит антитела, связывающиеся с рекомбинантным экстрацеллюлярным N-концевым доменом α7-субъединицы АХР крысы и не взаимодействующие с аналогичным доменом α1-субъединицы АХР ската Torpedo californica .

Ключевые слова: ацетилхолиновый рецептор, α7-субъединица; синтетические пептиды; антитела; В-эпитопы; Т-хелперные эпитопы

Биоорг. химия 2006, 32 (2):169-175