ФУНКЦИОНАЛИЗИРОВАННОЕ НАНОКОМПОЗИТНОЕ ПОКРЫТИЕ СТЕКЛЯННОЙ ПОВЕРХНОСТИ ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ ОЛИГОНУКЛЕОТИДОВ

© 2006 г. В. В. Анненков*, А. С. Левина**, Е. Н. Даниловцева*, Е. А. Филина*, Е. А. Михалева**, В. Ф. Зарытова**

^*Лимнологический институт СО РАН, Иркутск;
^**Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090, Новосибирск, просп. Акад. Лаврентьева, 8

Поступила в редакцию 22.06.2005 г. Принята к печати 08.08.2005 г.

Для создания ДНК-чипов сконструирован новый тип покрытий на основе органо-неорганического нанокомпозита – сополимера поливинилбутираля и тетраэтоксисилана. Кремнийорганическую композицию функционализировали путем введения в нее сополимеров винилового эфира моноэтаноламина, которые, помимо аминогрупп, содержат якорные винилоксидные звенья, способные реагировать с силанольными группами нанокомпозита. Полученные покрытия образуют на стекле пленку с высокой поверхностной плотностью аминогрупп (до 700 групп/нм²), пригодную для «трехмерной» иммобилизации олигонуклеотидов. Присоединение олигонуклеотидов, несущих аминолинкер, с помощью бифункциональных реагентов (например, фенилендиизотиоцианата) позволяет достичь плотности иммобилизации 0.5–1.6 пмоль/мм². Более высокая плотность (10–12 пмоль/мм²) получена при иммобилизации олигонуклеотидов с селективно активированной концевой фосфатной группой. Активацию осуществляли с помощью пары реагентов трифенилфосфин–дипиридилдисульфид в присутствии N-оксида диметиламинопиридина. Показана принципиальная возможность использования полученных ДНК-чипов для детекции ДНК.

Ключевые слова: нанокомпозит; поливинилбутираль; полисилоксан; олигонуклеотиды; иммобилизация; ДНК-чипы

Биоорг. химия 2006, 32 (5):511-519