ФЕРМЕНТЫ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ: СТАБИЛЬНОСТЬ И СТАБИЛИЗАЦИЯ ФЕРМЕНТА, ЛИЗИРУЮЩЕГО КЛЕТКИ Streptococcus pyogenes
© 2008 г. Н. Л. Клячко*#, Н. Ф. Дмитриева**, А. С. Ещина*, О. В. Игнатенко*, Л. Ю. Филатова*, Е. И. Райнина*,***, А. К. Казаров*, А. В. Левашов*
#Тел.: (495) 939-3476; факс: (495) 939-5417; e-mail: klyachko@enzyme.chem.msu.ru
*Химический факультет Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова, 119992, Москва, Воробьевы горы; **Факультет профилактической медицины, Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Москва; ***Национальная Северо-Западная Тихоокеанская лаборатория, Ричланд, шт. Вашингтон, США
Поступила в редакцию 17.09.2007 г. Принята к печати 09.10.2007 г.
Изучено влияние различных соединений на активность и стабильность фаг-ассоциированного фермента, лизирующего клетки стрептококков групп А и С (PlyC). Обнаружено существенное подавление активности фермента при повышении ионной силы (в присутствии NaCl), а также при добавлении углеводов (моно-, ди- и полисахаридов), то есть агентов, являющихся стабилизирующими для многих ферментов. Установлено, что активность фермента существенно снижалась в присутствии положительно заряженных полиэлектролитов и поверхностно-активных веществ (ПАВ), но инкубация с мицеллообразующими веществами и отрицательно заряженными полиэлектролитами приводила к активации и стабилизации PlyC. Показано, что в мицеллярно-полиэлектролитной композиции M16 фермент сохранял активность в течение 2 месяцев, в то время как в буферном растворе в тех же условиях (рН 6.3, комнатная температура) практически полностью терял свою активность в течение 2 сут. Найдены характеристики температурной инактивации фермента, в частности, время его полуинактивации при различных температурах, позволяющие оценить его поведение при любой температуре и дать практические рекомендации для условий его хранения и использования.
Ключевые слова: ферменты бактериофагов; бактериальные инфекции; стрептококковые инфекции; фаг-ассоциированный фермент, лизирующий клетки стрептококков; стабильность и стабилизация.
Биоорг.химия 2008, 34(3): 416-421