СВОЙСТВА ПОСТПРОЛИНРАСЩЕПЛЯЮЩИХ ФЕРМЕНТОВ ИЗ Tenebrio molitor

© 2008 г. И. А. Гоптарь*, И. А. Кулемзина**, И. Ю. Филиппова*, Е. Н. Лысогорская*, Е. С. Оксенойт*, Д. П. Жужиков***, Я. Е. Дунаевский****, М. А. Белозерский****, Е. Н. Элпидина**** ^#

^#Тел.: (495) 939-55-51; факс: (495) 939-31-81; e-mail: elp@belozersky.msu.ru

*Химический факультет, **Факультет биоинженерии и биоинформатики, ***Биологический факультет и ****Институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова, 119991, Москва, ГСП-2, Воробьевы горы

Поступила в редакцию 02.07.2007 г. Принята к печати 20.07.2007 г.

Из средней кишки личинок большого мучного хрущака Tenebrio molitor впервые выделены и охарактеризованы два постпролинрасщепляющих фермента, ПРФ1 и ПРФ2, активных при гидролизе Z-AlaAlaPro-pNA, c молекулярной массой 101 и 62 кДа соответственно. Активность ПРФ1 наблюдается только в кислой области pH c максимумом при 5.6. ПРФ2 активен как в кислой, так и в щелочной среде с максимумом при рН 7.9. С помощью ингибиторного анализа показано, что ПРФ1 и ПРФ2 относятся к сериновым пептидазам. Получены свидетельства в пользу наличия остатка Cys вблизи активного центра ПРФ2. Специфический ингибитор пролилолигопептидаз Z-Pro-prolinal полностью ингибирует ПРФ2, но лишь частично ПРФ1. Изучена субстратная специфичность выделенных ферментов. Показано, что для ПРФ1 лучшим субстратом является Z-AlaAlaPro-pNA, а для ПРФ2 – Z-AlaPro-pNA. Совокупность исследованных свойств характеризует ПРФ2 как пролилолигопептидазу.

Ключевые слова: постпролинрасщепляющий фермент; пролилолигопептидаза; сериновая пептидаза; Tenebrio molitor, большой мучной хрущак.

Биоорг.химия 2008, 34(3): 310-316