РАВНОМЕРНО МЕЧЕННЫЕ ИЗОТОПАМИ ВОДОРОДА ЛИГАНДЫ ГЛУТАМАТНОГО И ДОФАМИНОВОГО РЕЦЕПТОРОВ

© 2009 г. Ю. А. Золотарев*^#, Ю. Ю. Фирстова²*, Д. А. Абаимов²*, А. К. Дадаян*, В. С. Козик*, А. В. Новиков³*, Н. В. Краснов³*, Б. В. Васьковский⁴*, И. В. Назимов⁴*, Г. И. Ковалев²*, Н. Ф. Мясоедов*

^#Тел.: (499) 196-02-13; факс: (499) 196-02-21; e-mail: zolya@img.ras.ru

*Институт молекулярной генетики РАН, 123182, Москва, пл. Курчатова, 2;
²*ГУ НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН, Москва;
³*Институт аналитического приборостроения РАН, С.-Петербург;
⁴*Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва

Поступила в редакцию 16.10.2008 г. Принята к печати 03.12.2008 г.

Исследована реакция высокотемпературного твердофазного каталитического изотопного обмена (ВТКИО) для получения меченных тритием и дейтерием лигандов глутаматного и дофаминового рецепторов. Меченные тритием (5S,10R)-(+)-5-метил-10,11-дигидро-5H-дибензо[a,d]циклопентен-5,10-имин ([G-³H]MK-801) и R(+)-7-гидрокси-N,N-ди-н-пропил-2-аминотетралин ([G-³H]-7-ОН-DPAT) получены с молярной радиоактивностью 210 и 120 Ки/ммоль соответственно. Изучено распределение изотопомеров меченных дейтерием лигандов с использованием времяпролетного масс-спектрометра МХ 5310(ESI-o-TOF) с электрораспылением и ортогональным вводом ионов. Среднее включение дейтерия на молекулу лиганда составило для [G-²H]MK-801 и [G-²H]-7-ОН-DPAT 11.09 и 3.21 атомов соответственно. Показано, что изотопная метка распределена по всей молекуле лигандов. Проведен анализ радиорецепторного связывания меченных тритием лигандов [G-³H]MK-801 и [G-³H]-7-ОН-DPAT со структурами мозга крыс Вистар. Показано, что [G-³H]MK-801 специфически связывается с мембранами гиппокампа крыс с K_d 8.3 ± 1.4 нМ, B_max при этом составляет 3345 ± 300 фмоль/мг белка. Для [G-³H]-7-ОН-DPAT продемонстрировано, что он специфически связывается с мембранами стриатума крыс с K_d 10.01 ± 0.91 нМ, B_max при этом составляет 125 ± 4.5 фмоль/мг белка. Сделан вывод, что реакция ВТКИО может быть использована для получения высоко меченных тритием (+)-MK-801 и 7-ОН-DPAT, сохраняющих свою физиологическую активность.

Ключевые слова: лиганды к рецепторам, меченные тритием и дейтерием; спилловер-водород; дофаминовые рецепторы; глутаматные рецепторы.

Биоорг.химия 2009, 35 (3): 323-333