КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ДНК В ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫХ АКТИВНЫХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИЯХ МЕТОДОМ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ

© 2010 г. М. Ю. Скоблов, Е. Д. Шибанова^#, Е. В. Ковалева, Д. И. Баирамашвили, Ю. С. Скоблов, А. И. Мирошников

^#Тел.: (495) 429-81-30; e-mail: shib@kou.ibch.ru

Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 15.05.2009 г. Принята к печати 29.05.2009 г.

Предложено использование полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР РВ) для количественного определения остаточной ДНК штамма-продуцента E. coli в фармацевтической субстанции генно-инженерного человеческого инсулина. Для количественной оценки ДНК использовали амплификацию фрагмента плазмидной ДНК bla-гена и фрагмента геномной ДНК E. coli гена 16S РНК. Определено количество плазмидной и геномной ДНК в полупродуктах на разных стадиях технологического процесса очистки инсулина и в готовой фармацевтической субстанции.

Ключевые слова: ПЦР в режиме реального времени; инсулин, фармацевтическая субстанция, остаточная ДНК.

Биоорг.химия 2010, 36 (1): 112-116