АНТИТЕЛА К СИНТЕТИЧЕСКИМ ПЕПТИДАМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ СУРВИВИНА В ОПУХОЛЕВЫХ ТКАНЯХ

© 2010 г. Е. В. Ахидова*^#, Т. Д. Волкова*, Д. О. Короев*, Я. С. Ким*, М. П. Филатова*, Н. М. Владимирова*, Т. А. Кармакова**, Л. Э. Завалишина**, Ю. Ю. Андреева**, О. М. Вольпина*

^#Тел.: (495) 336-57-77; e-mail: akhidova@gmail.com

*Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**ФГУ Научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена, Москва

Поступила в редакцию 19.05.2009 г. Принята к печати 15.06.2009 г.

Эндогенный белок сурвивин является перспективным биомаркером для диагностики онкологических заболеваний. Цель настоящего исследования – получение антител, специфичных к сурвивину и способных выявлять данный белок в опухолевых тканях. Были выбраны и синтезированы четыре пептида, соответствующих участкам (1–22), (54–74), (80–88)–(153–165) и (118–144) последовательности сурвивина-2B. Синтетическими пептидами проведена иммунизация кроликов и показано, что все пептиды в свободном виде, без конъюгации с высокомолекулярным носителем, стимулируют выработку у животных антител, связывающихся с рекомбинантным сурвивином. Из сывороток выделены очищенные противопептидные антитела и изучена их способность выявлять сурвивин в опухолевых тканях человека иммуногистохимическим методом. Установлено, что только антитела к пептиду (80–88)–(153–165) связываются с сурвивином, содержащимся в раковых опухолях молочной железы и мочевого пузыря. Показана также способность антител к данному пептиду выявлять сурвивин в лизатах опухолевых тканей методом иммуноблотинга. С помощью укороченных фрагментов локализован участок последовательности, на который направлены антитела, стимулированные пептидом (80–88)–(153–165).

Ключевые слова: сурвивин, синтетические пептиды, антитела.

Биоорг.химия 2010, 36 (2): 178-186