ПРЯМОЕ ВВЕДЕНИЕ ИЗОТОПОВ ¹⁸О В ПЕПТИДЫ И БЕЛКИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА МЕТОДОМ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ

© 2011 г. Ю.П. Козьмин*^#, А.В. Манойлов**, М.В. Серебрякова***, О.А. Миргородская****

^#Тел.: +7 (499) 724-76-64; e-mail: zibotic@mail.ru

*Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (ИБХ РАН), 117997, Москва, ГСП-7, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**Институт Аналитического приборостроения РАН, Санкт-Петербург;
***Институт биомедицинской химии В.Н. Ореховича РАМН, Москва;
****Научно-исследовательский институт гриппа, Санкт-Петербург

Поступила в редакцию: 23.03.2011 г. Принята к печати: 03.05.2011 г.

Продемонстрирован метод прямого введения изотопов ¹⁸О в карбоксильные группы пептидов и белков, посредством обмена с Н₂¹⁸О в присутствии TFA. Изотопная метка достаточно устойчива в широком диапазоне pH. Благодаря тому, что меченные таким образом соединения сохраняют свои физико-химические характеристики, они могут быть использованы в качестве внутреннего стандарта при определении аутентичных соединений в анализируемых объектах методами масс-спектрометрии. Методика может быть применима для количественного анализа пептидов и белков в биологических средах, для количественного изучения кинетики метаболизма и ферментативной активности. Количественный анализ полипептидов и белков комбинируется с триптическим гидролизом. При необходимости изотопная метка может быть введена сразу во все пептиды и белки контрольной биопробы, что делает ее пригодной в качестве стандарта для сравнительного анализа экспериментальных биопроб.

Ключевые слова: изотопный обмен ¹⁸О; белки; пептиды; количественный анализ; MALDI-MS; ESI-MS.

Биоорг.химия 2011, 37 (6): 793-806