ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КОНЪЮГАТА ТРИЙОДТИРОНИНБИОТИН СО СВЯЗЫВАЮЩИМИ БЕЛКАМИ В ИММУНОАНАЛИТИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ

© 2012 г. М. Е. Новаковский#, И. И. Вашкевич, О. В. Свиридов

#Тел.: 89160677815; e-mail: maxushob@gmail.com

Институт биоорганической химии НАН Беларуси, 220141, Минск, ул. Купревича, 5/2

Поступила в редакцию 23.05.2011 г. Принята к печати 21.10.2011г.

Описана новая конструкция тест-системы для определения свободного 3,3’,5-трийод-L-тиронина (Т3), гормона щитовидной железы, в сыворотке крови человека методами иммуноферментного (ИФА) и иммунорадиометрического (ИРМА) анализа. Для этой цели получен низкомолекулярный бифункциональный конъюгат, содержащий остатки Т3 и биотина (Бт). Конъюгат (Т3Бт) способен связываться биотиновой функцией с биотинсвязывающим белком на твердой фазе, а его T3-часть – взаимодействовать с моноклональным антителом к Т3 (анти-Т3-МАт), меченным пероксидазой хрена или йодом-125, в системах ИФА и ИРМА, соответственно. Иммунохимическое взаимодействие затруднено, если в этой реакции участвует остаток Т3 в составе предварительно сформированного твердофазного комплекса Т3Бт с авидином. Компьютерное моделирование показало, что в таком комплексе углеводный компонент авидина экранирует остаток йодтиронина. Cвязывание Т3Бт как с сайтами анти-Т3-МАт, не занятыми Т3, так и с твердофазным авидином достигалось отсроченным внесением Т3-Бт в контейнеры с иммобилизованным авидином, в которых предварительно соинкубировались меченое анти-Т3 МАт и анализируемая проба Т3.

Ключевые слова: конъюгат трийодтиронин-биотин; авидин; стрептавидин; свободный Т3; иммуноанализ.

Биоорг.химия 2012, 38 (4): 449-457