АНАЛИЗ ДЕВЯТИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ ОНКОМАРКЕРОВ НА ГИДРОГЕЛЕВОМ БИОЧИПЕ

© 2013 г. Ж. И. Зубцова*^,**, Е. Н. Савватеева*, В. И. Бутвиловская*, М. В. Цыбульская*, В. Р. Чечёткин*, Л. О. Самохина***, Л. И. Винницкий***, В. В. Масленников****, Ю. П. Резников****, А. С. Заседателев*^,**, А. Ю. Рубина*^,#

^#Тел.: +7 (499) 135-99-80; факс: +7 (499) 135-14-05; e-mail: arubina@biochip.ru

*ФГБУ Институт молекулярной биологии им. В.А.Энгельгардта РАН (ИМБ РАН), 119991, Москва, ул. Вавилова, 32;
**ФГАОУ ВПО Московский физико-технический институт (Государственный университет), Москва;
***ФГБУ Российский Научный Центр Хирургии имени академика Б.В.Петровского РАМН, Москва;
****ФГБУ Поликлиника №1 Управления делами Президента РФ, Москва

Поступила в редакцию 10.04.2013 г. Принята к печати 17.06.2013 г.

Разработан прототип тест-системы для одновременного количественного анализа девяти онкомаркеров в сыворотке крови. Основной частью тест-системы является биочип ОМ-9, который содержит иммобилизованные антитела против девяти онкомаркеров: альфа-фетопротеина (АФП), раково-эмбрионального антигена (РЭА), хорионического гонадотропина человека (ХГЧ), карбогидратных антигенов СА 15-3, СА 125, СА 19-9, свободной и общей форм простат-специфического антигена (ПСАсвоб, ПСАобщ), нейрон-специфической енолазы (НСЕ). Разработан протокол двустадийного сэндвич-анализа для проведения одновременного количественного определения девяти маркеров в сыворотке крови пациента. Получены основные аналитические характеристики метода, позволяющие рассматривать данный прототип тест-системы как перспективную разработку для дальнейшего клинического применения.

Прототип тест-системы был апробирован на образцах сывороток крови больных онкологическими заболеваниями (252 сыворотки) и на сыворотках здоровых доноров (185 сывороток). Было показано, что для больных онкозаболеваниями превышение концентрации одного или нескольких онкомаркеров над уровнем нормы наблюдалось в 76.6% случаев, в то время как для здоровых доноров мы регистрировали такое превышение концентрации какого-либо маркера только в 6% случаев.

Применение современных статистических методов обработки результатов медицинских исследований, ROC-анализа (receiver operating characteristic curves) и логистической регрессии, на примере группы больных колоректальным раком продемонстрировало значительно более высокую диагностическую эффективность одновременного анализа девяти онкомаркеров на биочипах (площадь под ROC-кривой (AUC) составила 0.84) по сравнению с традиционным в таких случаях анализом двух маркеров РЭА и СА 19-9 (AUC=0.59).

Разработанный прототип тест-системы может быть рекомендован как для оценки здоровья населения, например при проведении диспансеризации, так и для мониторирования опухолевого процесса в послеоперационном периоде или после курса специфической терапии.

Ключевые слова: белковые микрочипы, гидрогелевые биочипы, иммобилизованные антитела, колоректальный рак, одновременный иммуноанализ, онкомаркеры.

Биоорг. химия 2013, 39 (6): 693-704