КОНЪЮГАТЫ СТРЕПТОКИНАЗА-ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЬ С ПОВЫШЕННОЙ СТАБИЛЬНОСТЬЮ И СНИЖЕННЫМИ ПОБОЧНЫМИ ЭФФЕКТАМИ

© 2014 Р. Б. Айсина*^{, #}, Л. И. Мухаметова*, Д. В. Тюпа*, К. Б. Гершкович**, Д. А. Гулин**, С. Д. Варфоломеев*

^#Факс: (495) 939-54-17; e-mail: aisina2004@mail.ru

* ГУНУ Химический факультет Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова, Ленинские горы, 119992, Москва;
** ФГБУН Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, 119991, Москва, ул. Косыгина, 4

Поступила в редакцию 03.10 2013. Принята к печати 14.04 2014.

Ковалентные конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 с различными степенями модификации аминогрупп белка получены вариацией времени инкубации стрептокиназы (СК) с активированным полиэтиленгликолем (M 2 и 5 кДа, ПЭГ2 и ПЭГ5); изучены их свойства в сравнении со свойствами свободной СК in vitro. Показано, что максимально стабильные в плазме и сохраняющие 80% исходной фибринолитической активности конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 образуются при степенях модификации аминогрупп белка 54 и 52% соответственно. При взаимодействии данных конъюгатов с плазминогеном в эквимолярных концентрациях образуются активаторные комплексы плазмина (Пл) Пл^.СК-ПЭГ2 и Пл^.СК-ПЭГ5, максимальная амидазная активность которых равна активности комплекса Пл с нативной СК. Найдено, что каталитическая эффективность активации плазминогена (k_Пг/K_Пг) комплексом Пл^.СК-ПЭГ2 немного выше (2.84 мин^-1 мкM^-1), а комплексом Пл^.СК-ПЭГ5 ниже (1.17 мин^-1 мкM^-1), чем немодифицированным комплексом Пл^.СК (2.1 мин^-1 мкM^-1). Исследование кинетики лизиса сгустков из плазмы крови человека и истощение уровней плазминогена и фибриногена в плазме под действием равных доз свободной СК и указанных конъюгированных образцов СК показало, что конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 обладают высокой тромболитической активностью (89 и 72% от активности свободной СК соответственно) и вызывают в 3.5–4 раза меньшие побочные эффекты, чем свободная СК. Полученные нами конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 с повышенной стабильностью в плазме и низким уровнем побочных эффектов могут быть использованы в терапии тромботических заболеваний.

Ключевые слова: стрептокиназа, плазминоген, конъюгаты с полиэтиленгликолем, активность, стабильность; полиэтиленгликоль, фибриноген.

Биоорг. химия 2014, 40 (5): 560-570