ПРОТЕОМНЫЙ АНАЛИЗ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ЭКЗОСОМ КРОВИ В НОРМЕ И ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЯХ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ¹

© 2017 г. С. Н. Тамкович*^, **^, ****^{, #}, Ю. С. Бакакина***, О. С. Тутанов*, А. К. Сомов*, Н. А. Кирюшина*****, Л. В. Дубовская***, И. Д. Волотовский***, П. П. Лактионов*^, ******

^#Тел.: +7 (383) 363-51-44; эл. почта: s.tamk@niboch.nsc.ru

*ФГБУН Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Россия, 630090, г. Новосибирск, пр. Ак. Лаврентьева, 8;
**Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Россия, 119991, г. Москва, Ломоносовский пр., 31-5;
***Институт биофизики и клеточной инженерии Национальной академии наук Беларуси, Россия, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27;
****Новосибирский национальный исследовательский государственный университет, Россия, 630090, Новосибирск, ул. Пирогова, 2;
*****ГБУ здравоохранения Новосибирский области “Новосибирский областной клинический онкологический диспансер” Министерства здравоохранения Новосибирский области, Россия, 630018, Новосибирск, ул. Плахотного, 2;
******ФГБУ “Новосибирский научно-исследовательский институт патологии кровообращения имени академика Е.Н. Мешалкина” Министерства здравоохранения РФ, Россия, 630090, Новосибирск, ул. Речкуновская, 15

Поступила в редакцию 16.06.2016 г. Принята к печати 04.07.2016 г.

DOI: 10.7868/S013234231702018X

Микровезикулы из плазмы крови и суммарные микровезикулы крови, включающие микровезикулы, связанные с поверхностью клеток крови, и микровезикулы плазмы крови, здоровых женщин и больных раком молочной железы были выделены методом фильтрации и ультрацентрифугирования. При помощи проточной цитофлуориметрии с антителами против универсальных экзосомальных маркеров обнаружено, что в препаратах микровезикул из крови здоровых женщин и больных раком молочной железы можно идентифицировать несколько субпопуляций экзосом, которые по интенсивности медианы флуоресценции распределены следующим образом: CD24/СD9 > СD9/СD81 > CD9/CD63 = CD24/CD63. При помощи анализатора частиц NanoSight NS300 (Malvern Instruments Ltd., Великобритания) показано, что содержание экзосом в пулированных образцах крови здоровых женщин и больных раком молочной железы не отличается и составляет (3.71±1.15)×10⁷ и (3.99±1.03)×10⁷ частиц/мл плазмы крови и (7.66±0.7)×10⁷ и (9.4±1.24)×10⁷ частиц/мл суммарной крови соответственно. Сравнительный анализ протеомных карт экзосомальных белков здоровых женщин и больных раком молочной железы, полученных с помощью двумерного электрофореза, позволил установить значимые различия в уровне экспрессии и наборе белков в норме и патологии. Эти данные могут быть использованы для идентификации экзосомальных протеомных маркеров рака молочной железы, выделения опухолеспецифичных экзосом и диагностики данного онкологического заболевания.

Ключевые слова: экзосомы, кровь, рак молочной железы, протеомика, двумерный (2D) электрофорез, проточная цитофлуориметрия, белки, биомаркеры.

Биоорг. химия 2017, 43 (2): 146-156

___________________________

¹Статья публикуется по материалам сообщения, представленного на конференции “Химическая биология-2016”; г. Новосибирск, 24–29 июля 2016 г.