БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ПЕПТИДНОГО АНАЛЬГЕТИКА – ПУРОТОКСИНА‑1 ИЗ ЯДА ПАУКА Geolycosa sp.

© 2018 г. Р. С. Есипов*, В. Н. Степаненко, И. О. Зверева, Д. А. Макаров, М. А. Костромина, Т. И. Костромина, Т. И. Муравьева, А. И. Мирошников, Е. В. Гришин

*Тел.: +7 (495) 366-68-33; эл. почта: esipov@ibch.ru

ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, 17997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Принята к печати 09.06.2017 г. Поступила в редакцию 22.05.2017 г.

DOI: 10.7868/S0132342318010037

Тяжeлые хронические и порой неизлечимые заболевания часто сопровождаются болевым синдромом. Одним из потенциальных высокоэффективных препаратов анальгетического действия является пуротоксин‑1, выделенный из яда среднеазиатского паука Geolycosa sp. и селективно ингибирующий пуринергический рецептор Р2Х3, который рассматривается в качестве мишени при купировании болевых состояний. Для получения рекомбинантного пуротоксина‑1 были созданы четыре генно-инженерных конструкции с разными белками-носителями для экспрессии в E. coli: pTRX-PT1, pCBD-PT1, pGyrA-PT1, pDnaB-PT1. Наиболее эффективной оказалась конструкция с мини-интеином DnaB из Synechocystis sp. С использованием полученного штамм-продуцента E. coli C3030/pDnaB-PT1 была разработана лабораторная методика, на основе которой в результате оптимизации и масштабирования была создана пилотная технология получения рекомбинантного пуротоксина‑1. С ее помощью было наработано 6 г препарата рекомбинантного РТ1 с подтвержденной фармацевтической чистотой для проведения доклинических испытаний.

Ключевые слова: получение рекомбинантных белков, интеин, анальгетический пептид, токсин.

Биоорг. химия 2018, 44 (1): 38-46