ГИБРИДНЫЙ БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ БЕЛОК НА ОСНОВЕ ПОРИНА OMPF И ВЫСОКОАКТИВНОЙ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ ¹

© 2018 г. Н. С. Буйновская*^{, #}, Л. А. Балабанова*^, **, О. Ю. Портнягина*, О. Д. Новикова*, В. А. Рассказов*

^#Тел.: +7 (964) 445-50-83; эл. почта: ninok1993@mail.ru

*Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова, ДВО РАН, 690022, Владивосток, пр-т 100-летия Владивостока, 159/2;
**Дальневосточный Федеральный Университет, о. Русский, кампус ДВФУ, корпус A, уровень 9, A930–A941, Владивосток, Приморский край

Поступила в редакцию 18.12.2017 г. Принята к печати 06.02.2018 г.

DOI: 10.1134/S013234231804005X

Для усовершенствования ИФА-метода диагностики псевдотуберкулеза получен генно-инженерный гибридный бифункциональный белок (CmAP/OmрF) на основе порообразующего белка наружной мембраны патогенной для человека бактерии Yersinia pseudotuberculosis – порина OmpF, и высокоактивной щелочной фосфатазы морской бактерии Cobetia amphilecti КММ 296 (CmAP). Модуль OmpF в гибридном белке сохраняет свойства диагностического антигена возбудителя псевдотуберкулеза, а модуль CmAP является ферментной меткой для обнаружения комплексов порина со специфическими антителами. Активность CmAP/OmрF успешно подтверждена в реакции связывания с антителами к порину OmpF в мышиных антисыворотках, а также в сыворотках крови больных псевдотуберкулезом. Использование гибридного комплекса CmAP/OmpF для диагностики псевдотуберкулеза позволит исключить применение меченных ферментами вторых антител, как правило, необходимых при выявлении специфических антител в сыворотках крови пациентов, и, таким образом, упростить процедуру и сократить время проведения анализа.

Ключевые слова: щелочная фосфатаза, порин OmpF, ИФА, псевдотуберкулез.
___________________________
¹ Статья публикуется по материалам сообщения, представленного на “Вторых Еляковских Чтениях”, 6 октября 2017 г., г. Владивосток.

Биоорг. химия 2018, 44 (4): 417-424